ඉතියෝපියාවේ SARS-CoV-2 හඳුනාගැනීම සඳහා න්‍යෂ්ටික අම්ල විස්තාරණ පරීක්ෂණ හතරක කාර්ය සාධනය

Nature.com වෙත පිවිසීම ගැන ඔබට ස්තුතියි. ඔබ සීමිත CSS සහය ඇති බ්‍රවුසර අනුවාදයක් භාවිතා කරයි. හොඳම අත්දැකීම සඳහා, ඔබ යාවත්කාලීන කළ බ්‍රවුසරයක් භාවිතා කරන ලෙස අපි නිර්දේශ කරමු (නැතහොත් Internet Explorer හි අනුකූලතා මාදිලිය අක්‍රිය කරන්න). ඊට අමතරව, අඛණ්ඩ සහාය සහතික කිරීම සඳහා, අපි විලාසිතා සහ JavaScript නොමැතිව වෙබ් අඩවිය පෙන්වමු.
ස්ලයිඩ තුනක කැරොසල් එකක් එකවර පෙන්වයි. වරකට විනිවිදක තුනක් හරහා ගමන් කිරීමට පෙර සහ ඊළඟ බොත්තම් භාවිතා කරන්න, නැතහොත් වරකට විනිවිදක තුනක් හරහා ගමන් කිරීමට අවසානයේ ඇති ස්ලයිඩර් බොත්තම් භාවිතා කරන්න.
2019 කොරෝනා වයිරස් රෝගය (COVID-19) පුපුරා යාමේ සිට, බොහෝ වාණිජ න්‍යෂ්ටික අම්ල විස්තාරණ පරීක්ෂණ (NAATs) ලොව පුරා සංවර්ධනය කර ඇති අතර ඒවා සම්මත විශ්ලේෂණයන් බවට පත්ව ඇත. පරීක්ෂණ කිහිපයක් ඉක්මනින් සංවර්ධනය කර රසායනාගාර රෝග විනිශ්චය පරීක්ෂණ සඳහා යෙදුවද, මෙම පරීක්ෂණවල කාර්ය සාධනය විවිධ සැකසුම් තුළ ඇගයීමට ලක් කර නොමැත. එබැවින්, මෙම අධ්‍යයනයේ අරමුණ වූයේ සංයුක්ත විමර්ශන ප්‍රමිතිය (CRS) භාවිතයෙන් Abbott SARS-CoV-2, Daan Gene, BGI සහ Sansure Biotech පරීක්ෂණවල කාර්ය සාධනය ඇගයීමයි. 2020 දෙසැම්බර් 1 සිට 30 දක්වා ඉතියෝපියානු මහජන සෞඛ්‍ය ආයතනයේ (EPHI) අධ්‍යයනය සිදු කරන ලදී. QIAamp RNA කුඩා කට්ටලය සහ Abbott DNA සාම්පල සකස් කිරීමේ ක්‍රමය භාවිතයෙන් නාසෝෆරින්ජියල් සාම්පල 164ක් ලබා ගන්නා ලදී. නිදර්ශක 164 න් 59.1% ධනාත්මක වූ අතර 40.9% CRS සඳහා සෘණ විය. Sansure Biotech ධනාත්මක බව CRS (p <0.05) හා සසඳන විට සැලකිය යුතු ලෙස අඩු විය. Sansure Biotech ධනාත්මක බව CRS (p <0.05) හා සසඳන විට සැලකිය යුතු ලෙස අඩු විය. Положительные результаты Sansure Biotech были значительно ниже по сравнению с CRS (p <0,05). Sansure Biotech හි ධනාත්මක ප්රතිඵල CRS හා සසඳන විට සැලකිය යුතු ලෙස අඩු විය (p <0.05).与CRS 相比, Sansure Biotech 的阳性率显着较低（p <0.05）。与CRS 相比, Sansure Biotech 的阳性率显着较低（p <0.05）。 У Sansure Biotech было значительно меньше положительных результатов по сравнению с CRS (p <0,05). Sansure Biotech CRS (p <0.05) හා සසඳන විට සැලකිය යුතු තරම් අඩු ධනාත්මක ප්රතිඵල ලබා ඇත.CRS හා සසඳන විට විශ්ලේෂණ හතරේ සමස්ත එකඟතාවය 96.3-100% විය. Sansure Biotech විශ්ලේෂණයේ අඩු ධනාත්මකතා අනුපාතයට අමතරව, පරීක්ෂණ හතරේ කාර්ය සාධනය බොහෝ දුරට සැසඳිය හැකි විය. එනිසා, Sansure Biotech [පර්යේෂණ පමණි (RUO)] විශ්ලේෂණය ඉතියෝපියාවේ එහි භාවිතය සඳහා අමතර වලංගු භාවයක් අවශ්‍ය වේ. අවසාන වශයෙන්, සුදුසු නිෂ්පාදකයාගේ හිමිකම් සමඟ විශ්ලේෂණයන් ඇගයීම සඳහා අතිරේක පර්යේෂණ සලකා බැලිය යුතුය.
රසායනාගාර පරීක්ෂණ යනු ලෝක සෞඛ්‍ය සංවිධානයේ (WHO) කොරොන වයිරස් රෝග 2019 (COVID-19) සඳහා වන උපායමාර්ගික සැලැස්මේ (SPRP) කොටසකි. ලෝක සෞඛ්‍ය සංවිධානය උපදෙස් දෙන්නේ රටවල සූදානම, නිසි සිද්ධි කළමනාකරණය, සුපරීක්ෂාකාරී බව සහ මහජන සෞඛ්‍ය අභියෝගවලට කඩිනම් ප්‍රතිචාර දැක්වීම සඳහා රසායනාගාර ධාරිතාවක් ගොඩනගා ගත යුතු බවයි. මෙයින් ඇඟවෙන්නේ නැගී එන බෝවන රෝග කාරකයන්ගේ රෝග සහ වසංගත රෝග ලක්ෂණ සහ ඒවා පැතිරීම පාලනය කිරීම සඳහා රසායනාගාරයේ කාර්යභාරය ප්‍රධාන බවයි.
COVID-19 රෝග විනිශ්චය සඳහා වසංගත රෝග සහ වෛද්‍ය තොරතුරු, පුද්ගලික රෝග ලක්ෂණ/ලකුණු, සහ විකිරණ සහ රසායනාගාර දත්ත2 අවශ්‍ය වේ. COVID-19 පුපුරා යාම චීනයේ වුහාන් හි වාර්තා වූ දා සිට, ලොව පුරා බොහෝ වාණිජ න්‍යෂ්ටික අම්ල විස්තාරණ පරීක්ෂණ (NAATs) සංවර්ධනය කර ඇත. තත්‍ය කාලීන ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීමේ පොලිමරේස් දාම ප්‍රතික්‍රියාව (rRT-PCR) දරුණු උග්‍ර ශ්වසන සින්ඩ්‍රෝමය 2 (SARS-CoV-2)3 ආසාදනය පිළිබඳ රසායනාගාර රෝග විනිශ්චය සඳහා සාමාන්‍ය සහ සම්මත ක්‍රමයක් ලෙස භාවිතා කර ඇත. SARS-CoV-2 අණුක හඳුනාගැනීම සාමාන්‍යයෙන් ORF1a/b (විවෘත කියවීමේ රාමුව 1a/b) හි N (නියුක්ලියෝකැප්සිඩ් ප්‍රෝටීන් ජානය), E (ලියුම් කවර ප්‍රෝටීන් ජානය) සහ RdRp (RNA මත යැපෙන RNA පොලිමරේස් ජානය) ජාන මත පදනම් වේ. . ජාන) වෛරස් ජෙනෝමයෙන් හඳුනාගත් කලාපය. වෛරස් හඳුනාගැනීම සඳහා වෛරස් ජෙනෝමවල ඇති ප්‍රධාන සංරක්‍ෂිත කලාප ලෙස ඒවා සැලකේ4. මෙම ජාන අතර, RdRp සහ E ජානවල ඉහළ විශ්ලේෂණාත්මක හඳුනාගැනීමේ සංවේදීතාවයක් ඇති අතර N ජානය අඩු විශ්ලේෂණාත්මක සංවේදීතාවයක් ඇත5.
PCR විශ්ලේෂණයන්හි කාර්ය සාධනය විවිධ සාධක මත පදනම්ව වෙනස් විය හැක: නිස්සාරණ ප්‍රතික්‍රියාකාරක, වර්ධක/අනාවරක ප්‍රතික්‍රියාකාරක, නිස්සාරණ ක්‍රමය, PCR යන්ත්‍රයේ ගුණාත්මකභාවය සහ අනෙකුත් උපකරණ. 2020 අප්‍රේල් වන විට, රටවල් නවයකින් විවිධ රෝග විනිශ්චය උපාංග 48කට වඩා COVID-196 රෝග විනිශ්චය සඳහා හදිසි භාවිත අවසරය (EUA) ලැබී ඇත. ඉතියෝපියාවේ, ABI 7500, Abbott m2000, Roche 48000 සහ Quant-studio7 ඇතුළු මහජන සෞඛ්‍ය ආයතන 26ක SARS-CoV-2 PCR හඳුනාගැනීම සඳහා තත්‍ය කාලීන PCR වේදිකා 14කට වඩා භාවිත කෙරේ. මීට අමතරව, Daan Gene පරීක්ෂණය, Abbott SARS-CoV-2 පරීක්ෂණය, Sansure Biotech පරීක්ෂණය, සහ SARS-CoV-2 BGI පරීක්ෂණය වැනි විවිධ PCR පරීක්ෂණ කට්ටල තිබේ. rRT-PCR ඉතා සංවේදී වුවද, COVID-19 සහිත සමහර රෝගීන් වැරදි ඍණාත්මක ප්‍රතිඵල වාර්තා කරන්නේ, නුසුදුසු එකතු කිරීම, ප්‍රවාහනය, ගබඩා කිරීම සහ හැසිරවීම සහ රසායනාගාර පරීක්ෂණ හේතුවෙන් සාම්පලවල වෛරස් රයිබොනියුක්ලික් අම්ලයේ (RNA) පිටපත් ප්‍රමාණවත් නොවීමයි. පුද්ගලයින්ගේ කොන්දේසි සහ ක්‍රියා8. මීට අමතරව, නියැදි හෝ පාලන වැරදි ලෙස හැසිරවීම, චක්‍ර සීමාව (Ct) සැකසීම, සහ අනෙකුත් ව්‍යාධිජනක න්‍යෂ්ටික අම්ල හෝ අක්‍රිය/අවශේෂ SARS-CoV-2 RNA සමඟ හරස් ප්‍රතික්‍රියාකාරිත්වය rRT-PCR9 විශ්ලේෂණයන්හි ව්‍යාජ ධනාත්මක ප්‍රතිඵලවලට හේතු විය හැක. මේ අනුව, PCR පරීක්ෂණ මගින් සත්‍ය වශයෙන්ම ක්‍රියාකාරී වෛරස් ජාන අතර වෙනස හඳුනා ගැනීමට පවා නොහැකි බැවින්, ජාන කොටස් වල වාහකයන් හඳුනා ගත හැකි බව පැහැදිලිය, එබැවින් පරීක්ෂණ මගින් හඳුනාගත හැක්කේ වාහකයන් පමණක් මිස රෝගීන් නොවේ10. එබැවින්, අපගේ සැකසුම තුළ සම්මත ක්රම භාවිතයෙන් රෝග විනිශ්චය කාර්ය සාධනය තක්සේරු කිරීම වැදගත් වේ. බොහෝ NAAT ප්‍රතික්‍රියාකාරක ඉතියෝපියානු මහජන සෞඛ්‍ය ආයතනයේ (EPHI) සහ රට පුරා ඇතත්, ඒවායේ කාර්යක්ෂමතාව පිළිබඳ සංසන්දනාත්මක ඇගයීමක් තවමත් වාර්තා වී නොමැත. එබැවින්, සායනික නිදර්ශක භාවිතයෙන් rRT-PCR මගින් SARS-CoV-2 හඳුනාගැනීම සඳහා වාණිජමය වශයෙන් පවතින කට්ටලවල සංසන්දනාත්මක කාර්ය සාධනය ඇගයීම මෙම අධ්‍යයනයේ අරමුණ විය.
මෙම අධ්‍යයනයට COVID-19 යැයි සැක කරන ලද සහභාගිවන්නන් 164 දෙනෙකු ඇතුළත් කර ඇත. සාම්පලවලින් බහුතරයක් ප්‍රතිකාර මධ්‍යස්ථානවලින් (118/164 = 72%), ඉතිරි 46 (28%) සහභාගිවන්නන් ප්‍රතිකාර නොවන මධ්‍යස්ථානවලින් විය. මධ්‍යස්ථානයේ ප්‍රතිකාර නොකළ සහභාගිවන්නන් අතර, 15 (9.1%) දෙනෙකුට සායනිකව සැක සහිත රෝගීන් සහ 31 (18.9%) දෙනෙකුට තහවුරු වූ රෝගීන්ගේ සම්බන්ධතා තිබුණි. සහභාගිවන්නන් අනූතුනක් (56.7%) පිරිමින් වූ අතර සහභාගිවන්නන්ගේ මධ්‍යන්‍ය (± SD) වයස අවුරුදු 31.10 (± 11.82) විය.
මෙම අධ්‍යයනයේ දී, COVID-19 සඳහා වූ පරීක්ෂණ හතරක ධනාත්මක සහ සෘණ අගයන් තීරණය කරන ලදී. මේ අනුව, Abbott SARS-CoV-2 විශ්ලේෂණය, Daan Gene 2019-nCoV විශ්ලේෂණය, SARS-CoV-2 BGI විශ්ලේෂණය, සහ Sansure Biotech 2019-nCoV විශ්ලේෂණයේ ධනාත්මක අනුපාත පිළිවෙලින් 59.1%, 58.5%, 57.5% සහ 55.9% විය. . ධනාත්මක සහ සෘණ සංයුක්ත යොමු ප්‍රමිතිය (CRS) ලකුණු 97 (59.1%) සහ 67 (40.9%), පිළිවෙලින් (වගුව 1). මෙම අධ්‍යයනයේ දී, CRS හි නිර්වචනය පදනම් වූයේ "ඕනෑම ධනාත්මක" රීතියක් මත වන අතර, පරීක්ෂණ ප්‍රතිඵල හතරකින්, එකම ප්‍රතිඵලය ලබා දුන් පරීක්ෂණ ප්‍රතිඵල දෙකක් හෝ වැඩි ගණනක් සත්‍ය ධනාත්මක හෝ සෘණාත්මක ලෙස සලකනු ලැබේ.
මෙම අධ්‍යයනයේදී, CRS හා සසඳන විට සියලුම විශ්ලේෂණ සඳහා 100% (95% CI 94.6-100) හි සෘණ ප්‍රතිශත ගිවිසුමක් (NPA) අපට හමු විය. Sansure Biotechnology විශ්ලේෂණය 93.8% (95% CI 87.2-97.1) හි අවම PPA එකක් පෙන්නුම් කළ අතර Daan Gene 2019-nCoV විශ්ලේෂණය 99.4% (95% CI 96.6-99.9) හි සමස්ත එකඟතාවයක් ඇති කර ඇත. ඊට ප්‍රතිවිරුද්ධව, SARS-CoV-2 BGI විශ්ලේෂණය සහ Sansure Biotech 2019-nCoV තක්සේරුව අතර සමස්ත එකඟතාවය පිළිවෙලින් 98.8% සහ 96.3% විය (වගුව 2).
CRS සහ Abbott SARS-CoV-2 විශ්ලේෂණ ප්‍රතිඵල අතර Cohen's kappa සංගුණකය සම්පුර්ණයෙන්ම අනුකූල විය (K = 1.00). ඒ හා සමානව, Daan Gene 2019-nCoV, SARS-CoV-2 BGI, සහ Sansure Biotech 2019-nCoV මගින් අනාවරණය කරගත් Cohen's kappa අගයන් CRS (K ≥ 0.925) සමඟ සම්පුර්ණයෙන්ම අනුකූල වේ. මෙම සංසන්දනාත්මක විශ්ලේෂණයේ දී, chi-square test (McNemar පරීක්ෂණය) පෙන්නුම් කළේ Sansure Biotech 2019-nCoV පරීක්ෂණ ප්‍රතිඵල CRS ප්‍රතිඵල (p = 0.031) (වගුව 2) ට වඩා සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් වූ බවයි.
රූපයේ දැක්වෙන පරිදි.1 Abbott SARS-CoV-2 විශ්ලේෂණයේ (ඒකාබද්ධ RdRp සහ N ජානය) අඩුම Ct අගයේ (< 20 Ct) ප්‍රතිශතය 87.6% ක් වූ අතර Sansure Biotech 2019-nCoV විශ්ලේෂණයේ ORF1a/b ජාන Ct අගය පෙන්නුම් කළේ අඩු ප්‍රතිශතයක් බවයි. Ct අගය (< 20 Ct) 50.3% සහ ඉහළ Ct අගය (36-40 Ct) 3.2% කි. 1 Abbott SARS-CoV-2 විශ්ලේෂණයේ (ඒකාබද්ධ RdRp සහ N ජානය) අඩුම Ct අගයේ (< 20 Ct) ප්‍රතිශතය 87.6% ක් වූ අතර Sansure Biotech 2019-nCoV විශ්ලේෂණයේ ORF1a/b ජාන Ct අගය පෙන්නුම් කළේ අඩු ප්‍රතිශතයක් බවයි. Ct අගය (< 20 Ct) 50.3% සහ ඉහළ Ct අගය (36-40 Ct) 3.2% කි.රූපයේ දැක්වෙන පරිදි.1, процент наименьшего значения Ct (< 20 Ct) анализа Abbott SARS-CoV-2 (комбинированный ген RdRp и N) состанизение гена ORF1a/b анализа Sansure Biotech 2019-nCoV показало что процент низкого значения Ct (< 20 Ct) составлял 50,3% (36-40 Ct) составляло 3,2%. 1, Abbott SARS-CoV-2 (ඒකාබද්ධ ජාන RdRp සහ N) හි අඩුම Ct අගය (< 20 Ct) විශ්ලේෂණයේ ප්‍රතිශතය 87.6% ක් වූ අතර Sansure Biotech 2019-nCoV හි ORF1a/b ජාන විශ්ලේෂණයේ Ct අගය පෙන්නුම් කළේය. අඩු Ct අගයේ ප්‍රතිශතය (< 20 Ct) 50.3% ක් වන අතර, ඉහළ අගය Ct (36-40 Ct) 3.2% ක් විය.如图1 所示，Abbott SARS-CoV-2 检测（结合RdRp 和N 基因）的最低Ct 值百分比（< 20% Bitech,S7.7%. 2019-nCoV 检测的ORF1a/b 基因Ct 值显示低Ct 值(< 20 Ct) 的百分比为50.3%,高Ct 值(36–40 Ct)的百分比为3.2%。 රූප සටහන 1 හි පෙන්වා ඇති පරිදි, Abbott SARS-CoV-2 පරීක්ෂණයේ (RdRp සහ N ජානයේ සංයෝගය) අඩුම Ct අගය ප්‍රතිශතය (<20 Ct) 87.6% වේ, Sansure Biotech 2019-nCoV පරීක්ෂණයේ ORF1a/b ජාන Ct අගය අඩු Ct值(< 20 Ct) 的 ප්‍රතිශතය පෙන්වයි 50.3%, 高Ct 值(36-40 Ct) 的 ප්‍රතිශතය 3.2% කි. Как показано на рисунке 1, анлиз Abbott SARS-CoV-2 (сочетающий гены RdRp සහ N) имел самое низкое просентент Ct) 87,6%, ප්‍රසිද්ධ Ct GANA ORF1a/b в исследовании Sansure Biotech 2019- ඇනලිස් nCoV පොකසල් низкий රූප සටහන 1 හි පෙන්වා ඇති පරිදි, Abbott SARS-CoV-2 විශ්ලේෂණය (RdRp සහ N ජාන ඒකාබද්ධ කිරීම) 87.6% හි අඩුම ප්‍රතිශත Ct අගය (< 20 Ct) තිබූ අතර, Sansure හි ORF1a/b ජානයේ Ct අගය විය. Biotech 2019 අධ්‍යයනය - nCoV විශ්ලේෂණයෙන් පෙන්නුම් කළේ අඩු Ct. Процент значений (< 20 Ct) составил 50,3%, а процент высоких значений Ct (36-40 Ct) составил 3,2%. අගයන්හි ප්‍රතිශතය (< 20 Ct) 50.3% ක් වූ අතර ඉහළ Ct අගයන් (36-40 Ct) ප්‍රතිශතය 3.2% විය.Abbott SARS-CoV-2 B පරීක්ෂණය 30 ට වැඩි Ct අගයන් වාර්තා කර ඇත. අනෙක් අතට, BGI SARS-CoV-2 විශ්ලේෂණයේ ORF1a/b ජානයේ ඉහළ Ct අගය (> 36 Ct) ප්‍රතිශතයක් තිබුණේ 4% (රූපය 1). අනෙක් අතට, BGI SARS-CoV-2 විශ්ලේෂණයේ ORF1a/b ජානයේ ඉහළ Ct අගය (> 36 Ct) ප්‍රතිශතයක් තිබුණේ 4% (රූපය 1). С другой стороны, анлизе BGI SARS-CoV-2 gen ORF1a/b имел высокое значение Ct (> 36 Ct), процент котороны 1) අනෙක් අතට, BGI SARS-CoV-2 ජානය ORF1a/b විශ්ලේෂණයේ දී ඉහළ Ct අගයක් (> 36 Ct), එහි ප්‍රතිශතය 4% (රූපය 1) විය.另一方面，在BGI SARS-CoV-2 检测中，ORF1a/b 基因具有高Ct 值（> 36 Ct）的百分比为4% අනෙක් අතට, BGI SARS-CoV-2 හඳුනාගැනීමේදී, ඉහළ Ct අගය (>36 Ct) සහිත ORF1a/b ජානයේ ප්‍රතිශතය 4% වේ (රූපය 1). С другой стороны, в алализе BGI SARS-CoV-2 ප්‍රොසෙන්ට් ජෙනෝව් ORF1a/b с высокими значениями Ct (>36 Ct) со.4став). අනෙක් අතට, BGI SARS-CoV-2 විශ්ලේෂණයේදී, ඉහළ Ct අගයන් (> 36 Ct) සහිත ORF1a/b ජානවල ප්‍රතිශතය 4% (රූපය 1).
මෙම අධ්‍යයනයේ දී අපි නාසෝෆරින්ක්ස් සාම්පල 164 ක් ලබා ගත්තෙමු. සියලු වර්ගවල තක්සේරු කිරීම් සඳහා, අදාළ නිෂ්පාදකයින් විසින් නිර්දේශ කරන ලද ක්‍රම සහ කට්ටල භාවිතා කරමින් RNA හුදකලා කිරීම සහ විස්තාරණය සිදු කරන ලදී.
මෙම අධ්‍යයනයෙන් පෙන්නුම් කළේ SARS-CoV-2 සඳහා ඇබට්ගේ පරීක්ෂණය 100% ධනාත්මක, සෘණාත්මක සහ සමස්ත අනුකූලතාවක් සහිතව CRS හා සමාන හඳුනාගැනීමේ කාර්ය සාධනයක් ඇති බවයි. කොහෙන්ගේ කප්පා ගිවිසුම 1.00, CRS සමඟ සම්පූර්ණ එකඟතාව පෙන්නුම් කරයි. එක්සත් ජනපදයේ වොෂින්ටන් විශ්ව විද්‍යාලය විසින් කරන ලද සමාන අධ්‍යයනයකින් හෙළි වූයේ CDC හි රසායනාගාර-නිශ්චිත විශ්ලේෂණය (LDA) හා සසඳන විට SARS-CoV-2 සඳහා ඇබොට් පරීක්ෂණයේ සමස්ත සංවේදීතාව සහ විශේෂත්වය පිළිවෙලින් 93% සහ 100% බවයි. . 11. Abbott SARS-CoV-2 හඳුනාගැනීමේ පද්ධතිය පදනම් වී ඇත්තේ N සහ RdRp ජානවල එකවර ඒකාබද්ධ හඳුනාගැනීම මතයි, ජාන දෙකම වඩාත් සංවේදී වන අතර ව්‍යාජ සෘණ අවම කරයි. ඔස්ට්‍රියාවේ වියානා හි සිදු කරන ලද අධ්‍යයනයකින් පෙන්නුම් කළේ විශාල නිස්සාරණ නියැදි පරිමාවන් සහ හඳුනාගැනීමේ ප්‍රත්‍යාවර්ත පරිමාව තනුක බලපෑම් අවම කර හඳුනාගැනීමේ කාර්යක්ෂමතාව වැඩි කරන බවයි. මේ අනුව, SARS-CoV-2 විශ්ලේෂණය සඳහා ඇබට්ගේ පරිපූර්ණ ගැලපීම, ඒකාබද්ධ ජාන එකවර හඳුනා ගන්නා, සාම්පල විශාල සංඛ්‍යාවක් (මිලි ලීටර් 0.5) නිස්සාරණය කරන සහ විශාල ප්‍රවාහක ප්‍රමාණයක් (40 µl) භාවිතා කරන වේදිකා හඳුනාගැනීමේ පද්ධතියක් සමඟ සම්බන්ධ කළ හැකිය.
අපගේ ප්‍රතිඵල ද පෙන්නුම් කළේ Daan ජාන පරීක්ෂණයේ හඳුනාගැනීමේ කාර්ය සාධනය CRS හි ක්‍රියාකාරිත්වයට සමාන බවයි. මෙය චීනයේ Huainan හි Anhui විශ්ව විද්‍යාලයේ පවත්වන ලද අධ්‍යයනයකට සහ නිෂ්පාදකයාගේ 100% ධනාත්මක එකඟතාවයට අනුකූල වේ. ස්ථාවර ප්‍රතිඵල වාර්තා තිබියදීත්, එම eluate නැවත පරීක්‍ෂා කිරීමෙන් පසු එක් සාම්පලයක් ව්‍යාජ සෘණාත්මක වූ නමුත් Abbott SARS-CoV-2 සහ Sansure Biotech nCoV-2019 විශ්ලේෂණයන්හි ධනාත්මක විය. විවිධ ආකාරයේ විශ්ලේෂණයන් හරහා ප්‍රතිඵලවල විචල්‍යතාවයක් තිබිය හැකි බව මෙයින් ඇඟවේ. එසේ වුවද, China15 හි සිදු කරන ලද අධ්‍යයනයේ දී, Daan Gene විශ්ලේෂණයේ ප්‍රතිඵලය ඔවුන්ගේ විද්‍යාගාර-නිර්වචනය කළ විමර්ශන විශ්ලේෂණයට සාපේක්ෂව සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් විය (p <0.05). එසේ වුවද, China15 හි සිදු කරන ලද අධ්‍යයනයේ දී, Daan Gene විශ්ලේෂණයේ ප්‍රතිඵලය ඔවුන්ගේ විද්‍යාගාර-නිර්වචනය කළ විමර්ශන විශ්ලේෂණයට සාපේක්ෂව සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් විය (p <0.05). Тем не менее, в исследовании, проведенном в Китае15, результат анализа Daan Gene значительно отличался, 5000 laboratornogo etalonnogo analiza. කෙසේ වෙතත්, China15 හි අධ්‍යයනයක දී, Daan Gene ගේ විශ්ලේෂණ ප්‍රතිඵලය ඔවුන්ගේ රසායනාගාර විමර්ශන විශ්ලේෂණයට වඩා සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් විය (p <0.05).然而，在中国进行的研究中15,大安基因检测的结果与其实验室定义的参考检测相比有显着差异（p <0.05).然而，在中国进行的研究中15,大安基因检测的结果与其实验室定义的参考检测相比有显着差<0.05 Однако в исследовании, проведеном в Китае15, результаты генетического теста Daan значительно <пил, отли 5) сравнению с ego etalonnыm laboratornыm testom. කෙසේ වෙතත්, China15 හි අධ්‍යයනයක දී, Daan ගේ ජාන පරීක්ෂණයේ ප්‍රතිඵල එහි විමර්ශන රසායනාගාර පරීක්ෂණයට සාපේක්ෂව සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් විය (p <0.05).මෙම විෂමතාවය SARS-CoV-2 හඳුනාගැනීමේ විමර්ශන පරීක්ෂණයේ සංවේදීතාව නිසා විය හැකි අතර, හේතුව තීරණය කිරීමට වැඩිදුර අධ්‍යයනයන් වැදගත් විය හැක.
මීට අමතරව, අපගේ අධ්‍යයනයෙන් CRS සමඟ SARS-CoV-2 BGI විශ්ලේෂණයේ සංසන්දනාත්මක කාර්ය සාධනය ඇගයීමට ලක් කරන ලද අතර, විශිෂ්ට ධනාත්මක ප්‍රතිශත ගිවිසුම (PPA = 97.9%), සෘණ ප්‍රතිශත ගිවිසුම (NPA = 100%) සහ ස්ත්‍රී පුරුෂ භාවය අනුව සමස්ත ප්‍රතිශත එකඟතාවය ( OPA). ) = 98.8%). කොහෙන්ගේ කප්පා අගයන් හොඳ එකඟතාවයක් පෙන්නුම් කළේය (K = 0.975). Netherlands16 සහ China15 හි අධ්‍යයනයන් ස්ථාවර ප්‍රතිඵල පෙන්වා ඇත. SARS-CoV-2 BGI පරීක්ෂණය යනු 10 µl වර්ධක/අනාවරණය eluate භාවිතා කරන තනි ජාන (ORF1a/b) හඳුනාගැනීමේ පරීක්ෂණයකි. අපගේ විමර්ශන ප්‍රතිඵල සමඟ හොඳ සංඛ්‍යානමය එකඟතාවයක් තිබියදීත්, විශ්ලේෂණයට සම්පූර්ණ නියැදියෙන් ධනාත්මක සාම්පල දෙකක් (1.22%) මග හැරී ඇත. මෙය රෝගියාගේ සහ ප්‍රජා මට්ටම් දෙකෙහිම සම්ප්‍රේෂණ ගතිකත්වය සඳහා විශාල සායනික ඇඟවුම් ඇති කළ හැකිය.
මෙම අධ්‍යයනයේ ඇතුළත් තවත් සංසන්දනාත්මක විශ්ලේෂණයක් වූයේ Sansure Biotech nCoV-2019 rRT-PCR (RUO) විශ්ලේෂණයයි; සමස්ත තරග ප්‍රතිශතය 96.3% කි. ගිවිසුමේ ප්‍රබලතාවය CRS සමඟ සම්පුර්ණ එකඟතාවය පෙන්නුම් කරමින් 0.925 වූ Cohen's Kappa අගය මගින් ද තීරණය විය. නැවතත්, අපගේ ප්‍රතිඵල චීනයේ Changsha හි මධ්‍යම දකුණු විශ්ව විද්‍යාලයේ සහ චීනයේ Liuzhou City, Liuzhou මහජන රෝහලේ සායනික රසායනාගාර දෙපාර්තමේන්තුවේ සිදු කරන ලද අධ්‍යයනයන්ට සමාන වේ. ඉහත හොඳ සංඛ්‍යානමය අනුකූලතාව සටහන් වුවද, chi-square test (MacNemar පරීක්ෂණය) පෙන්නුම් කළේ Sansure Biotech විශ්ලේෂණයේ ප්‍රතිඵලය CRS හා සසඳන විට සංඛ්‍යානමය වශයෙන් සැලකිය යුතු වෙනසක් ඇති බවයි (p <0.005). ඉහත හොඳ සංඛ්‍යානමය අනුකූලතාව සටහන් වුවද, chi-square test (MacNemar පරීක්ෂණය) පෙන්නුම් කළේ Sansure Biotech විශ්ලේෂණයේ ප්‍රතිඵලය CRS හා සසඳන විට සංඛ්‍යානමය වශයෙන් සැලකිය යුතු වෙනසක් ඇති බවයි (p <0.005). Несмотря на то, что было зафиксировано указанное выше хорошее статистическое сответветствие, икто было (ක්‍රිටරි මැක්නමරා) 0,005). ඉහත හොඳ සංඛ්‍යානමය ගිවිසුම සටහන් කර ඇතත්, chi-square test (McNemar පරීක්ෂණය) පෙන්නුම් කළේ Sansure Biotech විශ්ලේෂණයේ ප්‍රතිඵලය CRS (p <0.005) හා සසඳන විට සංඛ්‍යානමය වශයෙන් සැලකිය යුතු වෙනසක් ඇති බවයි.尽管记录了上述良好的统计一致性，但卡方检验（MacNemar 检验）表明，Sansure Biotech相比具有统计学显着差异（p <0.005）。尽管 记录 ඔබ 上述 良好 统计 一致性 , 但 检验相比 සහ 显着 Несмотря на отмеченное выше хорошее stатистическое соответствие, критерий хи-квадрат (ක්රිටරි ක්වාඩ්රැට්) статистически значимую разницу (p <0,005) между анализом Sansure Biotech සහ CRS. ඉහත සඳහන් කළ හොඳ සංඛ්‍යානමය එකඟතාව තිබියදීත්, chi-square පරීක්ෂණය (McNemar පරීක්ෂණය) Sansure Biotech විශ්ලේෂණය සහ CRS අතර සංඛ්‍යානමය වශයෙන් සැලකිය යුතු වෙනසක් (p <0.005) පෙන්නුම් කළේය.CRS හා සසඳන විට සාම්පල හයක් (3.66%) ව්‍යාජ සෘණාත්මක බව සොයා ගන්නා ලදී (පරිපූරක වගුව 1); මෙය ඉතා වැදගත් වේ, විශේෂයෙන් වෛරසය සම්ප්‍රේෂණය කිරීමේ ගතිකත්වය ලබා දී ඇත. ඉහත දත්ත ද මෙම අඩු හඳුනාගැනීමේ අනුපාතයට සහය දක්වයි15.
මෙම අධ්‍යයනයේ දී, ඇබට් SARS-CoV-2 විශ්ලේෂණයේ වාර්තා කර ඇති අඩුම මධ්‍යන්‍ය Ct අගය සමඟ එක් එක් විශ්ලේෂණය සහ අදාළ වේදිකාව සඳහා Ct අගයන් තීරණය කරන ලදී. මෙම ප්‍රතිඵලය SARS-CoV-2 හඳුනාගැනීම සඳහා ඇබට්ගේ සමකාලීන ඒකාබද්ධ ජාන පරීක්ෂණ පද්ධතියට සම්බන්ධ විය හැක. එබැවින්, Figure 1 ට අනුව, Abbott SARS-CoV-2 ප්‍රතිඵලවලින් 87.6%ක Ct අගයන් 20ට වඩා අඩු විය. 20-30 පරාසයේ තිබුණේ කුඩා සාම්පල ප්‍රතිඵල (12.4%) පමණි. 30 ට වැඩි Ct අගයන් වාර්තා කර නොමැත. ඇබට්ගේ SARS-CoV-2 පැනල් ජාන පරීක්ෂණ ආකෘතියේ භාවිතයට අමතරව, මෙම ප්‍රතිඵලය අඩු හඳුනාගැනීමේ සීමාව (32.5 RNA පිටපත්/mL)18 හා සම්බන්ධ විය හැකිය, එය සමාගමේ පහළ සීමාව වන 100 RNA පිටපත් වලට වඩා තුන් ගුණයකින් අඩුය. /මිලි. මිලි)19.
මෙම අධ්‍යයනයට යම් සීමාවන් ඇත: පළමුව, සම්පත් හිඟකම හේතුවෙන් අපට [වෛරස් පැටවීම හෝ වෙනත් රසායනාගාර පරීක්ෂණ (LDA) වැනි] සම්මත/යොමු ක්‍රම නොමැත. දෙවනුව, මෙම අධ්‍යයනයේ දී භාවිතා කරන ලද සියලුම නිදර්ශක නාසෝෆරින්ජියල් ස්පුබ් වූ අතර ප්‍රති results ල වෙනත් නිදර්ශක වර්ග සඳහා අදාළ නොවූ අතර තෙවනුව, අපගේ නියැදි ප්‍රමාණය කුඩා විය.
මෙම අධ්‍යයනය නාසෝෆරින්ජියල් සාම්පල භාවිතයෙන් SARS-CoV-2 සඳහා rRT-PCR පරීක්ෂණ හතරක කාර්ය සාධනය සංසන්දනය කළේය. Sansure Biotech විශ්ලේෂණය හැර, සියලුම හඳුනාගැනීමේ විශ්ලේෂණවල සැසඳිය හැකි කාර්ය සාධනයක් තිබුණි. ඊට අමතරව, CRS (p <0.05) හා සසඳන විට Sansure Biotech විශ්ලේෂණය තුළ අඩු ධනාත්මකතා අනුපාතය හඳුනා ගන්නා ලදී. ඊට අමතරව, CRS (p <0.05) හා සසඳන විට Sansure Biotech විශ්ලේෂණය තුළ අඩු ධනාත්මකතා අනුපාතය හඳුනා ගන්නා ලදී. ක්‍රෝම් ටෝගෝ, в teste Sansure Biotech был выявлен низкий процент положительных результатов по сравнененые по сравны 05). මීට අමතරව, Sansure Biotech පරීක්ෂණය CRS (p <0.05) හා සසඳන විට ධනාත්මක ප්රතිඵලවල අඩු ප්රතිශතයක් පෙන්නුම් කළේය.此外，与CRS 相比, Sansure Biotech 检测的阳性率较低(p <0.05)。此外，与CRS 相比, Sansure Biotech 检测的阳性率较低(p <0.05)。 Кроме того, analyz Sansure Biotech имел более низкий уровень положительных результатов по сравнению < с, CRS (සීආර්එස් 50). මීට අමතරව, CRS (p <0.05) හා සසඳන විට Sansure Biotech විශ්ලේෂණයට අඩු ධනාත්මක අනුපාතයක් තිබුණි.PPA, NPA සහ සමස්ථ ගිවිසුමේ Sansure Biotech nCoV-2019 (RUO) විශ්ලේෂණය 93.5% ඉක්මවන අතර ගිවිසුම් අගය 0.925 හි Cohen Kappa ප්‍රබලතාවක් ඇත. අවසාන වශයෙන්, Sansure Biotech Assay (RUO) ඉතියෝපියාවේ භාවිතය සඳහා තවදුරටත් වලංගු භාවයක් අවශ්‍ය වන අතර, තනි නිෂ්පාදකයින්ගෙන් හිමිකම් ඇගයීමට අමතර පර්යේෂණ සලකා බැලිය යුතුය.
සංසන්දනාත්මක අධ්‍යයන සැලසුම අඩිස් අබාබා, එකා කොටෙබේ රෝහල, මිලේනියම් පල්ලියේ ප්‍රතිකාර මධ්‍යස්ථානය, සෙවුඩිටු අනුස්මරණ රෝහල සහ ශාන්ත පීතර ක්ෂය රෝග විශේෂඥ රෝහලේ සෞඛ්‍ය පහසුකම් හතරකදී සිදු කරන ලදී. 2020 දෙසැම්බර් 1 සිට 31 දක්වා කාලය තුළ දත්ත රැස් කරන ලදී. මෙම අධ්‍යයනය සඳහා වෛද්‍ය පහසුකම් හිතාමතාම තෝරාගෙන ඇත්තේ ඔවුන්ගේ ඉහළ රෝගීන් සංඛ්‍යාව සහ නගරයේ ප්‍රධාන ප්‍රතිකාර මධ්‍යස්ථාන තිබීම මත පදනම්වය. ඒ හා සමානව, ABI 7500 සහ Abbott m2000 තත්‍ය කාලීන PCR උපකරණ ඇතුළු උපකරණ, NAAT ප්‍රතික්‍රියාකාරක නිෂ්පාදකයින්ගේ නිර්දේශයන්ට අනුව තෝරා ගන්නා ලද අතර, ඉතියෝපියාවේ බොහෝ රසායනාගාර අවම වශයෙන් අවම වශයෙන් භාවිතා කළ බැවින්, මෙම අධ්‍යයනය සඳහා PCR හඳුනාගැනීමේ කට්ටල හතරක් තෝරා ගන්නා ලදී. ඔවුන්ගෙන් හතරක්. ජාන පරීක්ෂණය, Abbott SARS-CoV-2 පරීක්ෂණය, Sansure Biotech පරීක්ෂණය, සහ SARS-CoV-2 BGI පරීක්ෂණය අධ්යයනය අතරතුර සිදු කරන ලදී).
SARS-CoV-2 සඳහා පරීක්ෂණ 2020 දෙසැම්බර් 1 සිට 30 දක්වා සිදු කරන ලද්දේ EPHI වෙත යොමු කරන ලද COVID-19 සඳහා විමර්ශනය කරන පුද්ගලයින්ගෙන් වෛරස් ප්‍රවාහන මාධ්‍ය (VTM) (Miraclean Technology, Shenzhen, China) මිලිලීටර් 3ක් භාවිතා කරමිනි. පුහුණු නියැදි එකතු කරන්නන් විසින් නාසෝෆරින්ජියල් සාම්පල එකතු කර ත්‍රිත්ව ඇසුරුම්වල EPHI වෙත යවන ලදී. න්යෂ්ටික අම්ල හුදකලා කිරීමට පෙර, සෑම නියැදියකටම අනන්ය හඳුනාගැනීමේ අංකයක් පවරනු ලැබේ. අතින් සහ ස්වයංක්‍රීය නිස්සාරණ ක්‍රම භාවිතා කරමින් පැමිණි වහාම එක් එක් සාම්පලයෙන් නිස්සාරණය සිදු කෙරේ. මේ අනුව, ඇබට් m2000 ස්වයංක්‍රීයව නිස්සාරණය කිරීම සඳහා, නියැදියේ මිලි ලීටර් 1.3 (මිලි ලීටර් 0.8 මළ පරිමාව සහ මිලි ලීටර් 0.5 නිස්සාරණ ආදාන පරිමාව ඇතුළුව) එක් එක් නියැදියෙන් උපුටා ගන්නා ලද අතර ඇබට් ඩීඑන්ඒ නියැදි සකස් කිරීමේ පද්ධතිය හරහා (Abbot Molecular Inc. des Plaines, IL, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය). 96 [නියැදි 92 ක්, හඳුනාගැනීමේ පාලන දෙකක් සහ සැකිලි නොවන පාලන දෙකක් (NTC)] SARS-CoV-2 (EUA) වට දෙකක සමස්ත ක්‍රියාවලියට තත්‍ය කාලීනව ඇතුළත් කරන ලදී. පතල් කැණීම. ඒ හා සමානව, අතින් නිස්සාරණය සඳහා, එකම සාම්පල භාවිතා කරන්න (ස්වයංක්‍රීය නිස්සාරණය සහ සොයා ගැනීම සඳහා). මේ අනුව, ක්‍රියාවලිය පුරාවට, QIAamp Viral RNA Mini Kit (QIAGEN GmbH, Hilden, Germany) භාවිතයෙන් µl සාම්පල 140ක් 24 (සාම්පල 20ක්, පරීක්ෂණ පාලන දෙකක් සහ NTC දෙකක් ඇතුළුව) වට නවයක් පුරා කාණ්ඩ වශයෙන් උපුටා ගන්නා ලදී. SARS-CoV-2 BGI විශ්ලේෂණය, Daan Gene විශ්ලේෂණය සහ Sansure Biotech විශ්ලේෂණය භාවිතා කරමින් ABI 7500 තාප චක්‍රයක් භාවිතයෙන් අතින් නිස්සාරණය කරන ලද එලියුට් විස්තාරණය කර අනාවරණය කර ගන්නා ලදී.
SARS-CoV-2 වෛරස් RNA ස්වයංක්‍රීයව හුදකලා කිරීම සහ පිරිසිදු කිරීම ඇබට් DNA සාම්පල සකස් කිරීමේ ප්‍රතික්‍රියාකාරක භාවිතයෙන් චුම්බක පබළු මූලධර්මය අනුගමනය කරයි. සාම්පල අක්‍රිය කිරීම සහ වෛරස් අංශු ද්‍රාව්‍ය කිරීම ග්වානයිඩින් අයිසොතියෝසයනේට් අඩංගු ඩිටර්ජන්ට් භාවිතයෙන් ප්‍රෝටීන් ප්‍රතික්ෂේප කිරීමට සහ RNase අක්‍රිය කිරීමට සිදු කෙරේ. RNA පසුව සිලිකා භාවිතයෙන් ඝන අවධි වෙන් කිරීම මගින් ප්‍රෝටීන් වලින් වෙන් කරනු ලැබේ, එනම් ග්වානිඩීනියම් ලවණ සහ ලයිසිස් බෆරයේ ක්ෂාරීය pH අගය න්‍යෂ්ටික අම්ල සිලිකා (SiO2) වෙත බන්ධනය කිරීම ප්‍රවර්ධනය කරයි. සේදීමේ පියවර පැහැදිලි විසඳුමක් නිපදවීම සඳහා ඉතිරි ප්රෝටීන සහ සුන්බුන් ඉවත් කරයි. විනිවිද පෙනෙන RNA උපකරණයේ චුම්බක ක්ෂේත්‍රය භාවිතා කරමින් සිලිකා මත පදනම් වූ ක්ෂුද්‍ර අංශු වලින් හුදකලා වේ20,21. අනෙක් අතට, RNA අතින් හුදකලා කිරීම සහ පවිත්‍ර කිරීම සිදු කරනු ලබන්නේ චුම්බක ස්ථාවරයක් වෙනුවට කේන්ද්‍රාපසාරී භාවිතයෙන් සහ ක්ෂුද්‍ර අංශු ප්‍රත්‍යාවර්තයෙන් වෙන් කිරීම භාවිතා කර භ්‍රමණය තීරු ක්‍රමය මගිනි.
ඇබට් රියල්-ටයිම් SARS-CoV-2 හඳුනාගැනීමේ පරීක්ෂණය (Abbott Molecular, Inc.) නිෂ්පාදකයාගේ උපදෙස් අනුව සිදු කරන ලද අතර, WHO සහ FDA වෙතින් EUA19,22 ලැබුණි. මෙම ප්රොටෝකෝලය තුළ, නිස්සාරණයට පෙර නියැදි අක්රිය කිරීම විනාඩි 30 ක් සඳහා 56 ° C ජල ස්නානයක සිදු කරන ලදී. වෛරස් අක්‍රිය කිරීමෙන් පසුව, Abbott m2000 DNA නියැදි සකස් කිරීමේ පද්ධතියක් භාවිතයෙන් 0.5 ml VTM සිට Abbott m2000 SP උපකරණයක් මත න්‍යෂ්ටික අම්ල නිස්සාරණය සිදු කරන ලදී. නිෂ්පාදකයාට අනුව. ඇබට් m2000 RT-PCR උපකරණයක් භාවිතයෙන් විස්තාරණය සහ හඳුනාගැනීම සිදු කරන ලද අතර RdRp සහ N ජාන සඳහා ද්විත්ව හඳුනාගැනීම සිදු කරන ලදී. ROX) සහ VIC P (හිමිකාර සායම්) අභ්‍යන්තර පාලනයන් ඉලක්ක කර හඳුනා ගැනීම සඳහා, විස්තාරණ නිෂ්පාදන දෙකම එකවර හඳුනා ගැනීමට ඉඩ සලසයි.
මෙම කට්ටලයේ විස්තාරණ හඳුනාගැනීමේ ක්රමය එක්-පියවර RT-PCR තාක්ෂණය මත පදනම් වේ. ORF1a/b සහ N ජාන Daan Gene Technology විසින් ඉලක්කගත කලාප විස්තාරණය හඳුනා ගැනීම සඳහා සංරක්ෂණය කළ කලාප ලෙස තෝරා ගන්නා ලදී. විශේෂිත ප්‍රයිමර් සහ ප්‍රතිදීප්ත පරීක්ෂණ (FAM සමඟ ලේබල් කර ඇති N ජාන පරීක්ෂණ, VIC සමඟ ලේබල් කර ඇති ORF1a/b පරීක්ෂණ) සාම්පලවල SARS-CoV-2 RNA හඳුනා ගැනීමට නිර්මාණය කර ඇත. අවසාන එලියුන්ට් සහ ප්‍රධාන මිශ්‍රණ සකස් කර ඇත්තේ ප්‍රධාන මිශ්‍රණයේ 20 µl ට එලියුන්ට් 5 µl අවසාන පරිමාව 25 µl වෙත එකතු කිරීමෙනි. ABI 750024 තත්‍ය කාලීන PCR උපකරණයක් මත විස්තාරණය සහ හඳුනාගැනීම එකවර සිදු කරන ලදී.
ORF1a/b සහ N ජාන Sansure Biotech nCoV-2019 Nucleic Acid Diagnostic Kit (ප්‍රතිදීප්ත PCR හඳුනාගැනීම) භාවිතයෙන් අනාවරණය කර ගන්නා ලදී. ORF1a/b කලාපය සඳහා FAM නාලිකාව සහ N ජානය සඳහා ROX නාලිකාව තේරීමෙන් එක් එක් ඉලක්කගත ජාන සඳහා නිශ්චිත පරීක්ෂණ සකස් කරන්න. මෙම විශ්ලේෂණ කට්ටලයට, ප්‍රත්‍යාවර්තක සහ ප්‍රධාන මිශ්‍රණ ප්‍රතික්‍රියාකාරක පහත පරිදි එකතු කරනු ලැබේ: හඳුනාගැනීම/විස්තාරණය කිරීම සඳහා 30 µl ප්‍රධාන මිශ්‍ර ප්‍රතික්‍රියාකාරකයක් සහ 20 µl eluted සාම්පලයක් සකස් කරන්න. තත්‍ය කාලීන PCR ABI 750025 විස්තාරණය/අනාවරණය සඳහා භාවිතා කරන ලදී.
SARS-CoV-2 BGI පරීක්ෂණය යනු COVID-19 රෝග විනිශ්චය සඳහා ප්‍රතිදීප්ත තත්‍ය කාලීන rRT-PCR කට්ටලයකි. ඉලක්ක කලාපය SARS-CoV-2 ජෙනෝමයේ ORF1a/b කලාපයේ පිහිටා ඇත, එය තනි ජාන හඳුනාගැනීමේ ක්‍රමයකි. මීට අමතරව, මානව ගෘහ පාලන ජානය β-ඇක්ටින් අභ්‍යන්තරව නියාමනය කරන ලද ඉලක්ක ජානයකි. ප්‍රධාන මිශ්‍රණය සකස් කරනු ලබන්නේ ප්‍රධාන මිශ්‍ර ප්‍රතික්‍රියාකාරකයේ 20 µl සහ නිස්සාරණය කරන ලද RNA සාම්පලයේ 10 µl ළිං තහඩුවක මිශ්‍ර කිරීමෙනි. ABI 7500 ප්‍රතිදීප්ත ප්‍රමාණාත්මක තත්‍ය කාලීන PCR උපකරණයක් විස්තාරණය සහ හඳුනාගැනීම සඳහා භාවිතා කරන ලදී. සියලුම න්යෂ්ටික අම්ල විස්තාරණය, එක් එක් විශ්ලේෂණය සඳහා PCR ධාවන කොන්දේසි සහ ප්රතිඵල අර්ථ නිරූපණය කිරීම අදාළ නිෂ්පාදකයාගේ උපදෙස් අනුව සිදු කරන ලදී (වගුව 3).
මෙම සංසන්දනාත්මක විශ්ලේෂණයේ දී, අපි විශ්ලේෂණ හතර සඳහා සියයට එකඟතාව (ධනාත්මක, සෘණ සහ සමස්ත) සහ අනෙකුත් සංසන්දනාත්මක පරාමිතීන් තීරණය කිරීමට යොමු සම්මත ක්‍රමය භාවිතා නොකළෙමු. සෑම පරීක්ෂණ සංසන්දනයක්ම CRS සමඟ සිදු කරන ලදී, මෙම අධ්‍යයනයේ දී CRS "ඕනෑම ධනාත්මක" රීතිය මගින් සකසා ඇති අතර ප්‍රතිඵලය තීරණය කරන ලදී, එක් පරීක්ෂණයකින් නොව, අපි අවම වශයෙන් ගැලපෙන පරීක්ෂණ ප්‍රතිඵල දෙකක් භාවිතා කළෙමු. ඊට අමතරව, COVID-19 සම්ප්‍රේෂණයේදී, ව්‍යාජ ධනාත්මක ප්‍රතිඵලවලට වඩා ව්‍යාජ සෘණාත්මක ප්‍රතිඵල භයානකයි. එබැවින්, CRS ප්‍රතිඵලයකින් හැකි තරම් නිවැරදිව “ධනාත්මක” යැයි පැවසීමට, අවම වශයෙන් විශ්ලේෂණ පරීක්ෂණ දෙකක්වත් ධනාත්මක විය යුතුය, එනම් අවම වශයෙන් එක් ධනාත්මක ප්‍රතිඵලයක් EUA තක්සේරුවකින් පැමිණීමට ඉඩ ඇත. මේ අනුව, පරීක්ෂණ ප්‍රතිඵල හතරකින් එකම ප්‍රතිඵලය දෙන පරීක්ෂණ ප්‍රතිඵල දෙකක් හෝ වැඩි ගණනක් සත්‍ය ධනාත්මක හෝ ඍණාත්මක ලෙස සලකනු ලැබේ18,27.
ව්‍යුහගත දත්ත නිස්සාරණ ආකෘති භාවිතයෙන් දත්ත රැස් කරන ලදී, විස්තරාත්මක සංඛ්‍යාලේඛන සඳහා Excel සංඛ්‍යාන මෘදුකාංග සහ SPSS අනුවාදය 23.0 භාවිතා කරමින් දත්ත ඇතුළත් කිරීම සහ විශ්ලේෂණය සිදු කරන ලදී. ධනාත්මක, සෘණ සහ සමස්ත සියයට එකඟතාව විශ්ලේෂණය කරන ලද අතර, CRS සමඟ එක් එක් ක්‍රමයේ එකඟතාවයේ මට්ටම තීරණය කිරීම සඳහා කැපා ලකුණු භාවිතා කරන ලදී. කප්පා අගයන් පහත පරිදි අර්ථ දැක්වේ: මෘදු ගිවිසුම සඳහා 0.01 සිට 0.20 දක්වා, සාමාන්ය ගිවිසුම සඳහා 0.21 සිට 0.40 දක්වා, මධ්යස්ථ ගිවිසුම සඳහා 0.41-0.60, ප්රධාන ගිවිසුම සඳහා 0.61-0.80 සහ සම්පූර්ණ ගිවිසුම සඳහා 0.81-0.9928.
Adis Ababa විශ්වවිද්‍යාලයෙන් සදාචාරාත්මක අවසරය ලබාගෙන ඇති අතර මෙම අධ්‍යයනය සඳහා වූ සියලුම පර්යේෂණාත්මක ප්‍රොටෝකෝල ඉතියෝපියානු මහජන සෞඛ්‍ය ආයතනයේ විද්‍යාත්මක ආචාර ධර්ම සමාලෝචන මණ්ඩලය විසින් අනුමත කරන ලදී. EPHI ආචාර ධර්ම බලපත්‍රය සඳහා යොමු අංකය EPHI/IRB-279-2020 වේ. COVID-19 සඳහා ප්‍රතිකාර කිරීම සඳහා ඉතියෝපියානු ජාතික විස්තීර්ණ මාර්ගෝපදේශවල නිර්දේශ සහ විධිවිධානවලට අනුකූලව සියලුම ක්‍රම යොදන ලදී. ඊට අමතරව, අධ්‍යයනයට සහභාගී වීමට පෙර සියලුම අධ්‍යයන සහභාගිවන්නන්ගෙන් ලිඛිත දැනුවත් කැමැත්ත ලබා ගන්නා ලදී.
මෙම අධ්‍යයනයෙන් ලබාගත් හෝ විශ්ලේෂණය කරන ලද සියලුම දත්ත මෙම ප්‍රකාශිත ලිපියට ඇතුළත් කර ඇත. මෙම අධ්‍යයනයේ ප්‍රතිඵලවලට අනුබල දෙන දත්ත සාධාරණ ඉල්ලීමක් මත අදාළ කතුවරයාගෙන් ලබා ගත හැකිය.
ලෝක සෞඛ්‍ය සංවිධානය. COVID-19 සඳහා රසායනාගාර පරීක්ෂණ උපාය මාර්ග සඳහා නිර්දේශ: අතුරු මඟපෙන්වීම, 2020 මාර්තු 21 අංක WHO/2019-nCoV/lab_testing/2020.1 (WHO, 2020).
Mouliou, DS, Pantazopoulos, I. & Gourgoulianis, KI COVID-19 හදිසි අවස්ථා දෙපාර්තමේන්තුවේ ස්මාර්ට් රෝග විනිශ්චය: සියල්ල ප්‍රායෝගිකව. Mouliou, DS, Pantazopoulos, I. & Gourgoulianis, KI COVID-19 හදිසි අවස්ථා දෙපාර්තමේන්තුවේ ස්මාර්ට් රෝග විනිශ්චය: සියල්ල ප්‍රායෝගිකව.Muliou, DS, Pantazopoulos, I. සහ Gurgulianis, KI හදිසි අනතුරු අංශයේ COVID-19 පිළිබඳ බුද්ධිමත් රෝග විනිශ්චය: ප්‍රායෝගිකව ඇති සියල්ල.Muliou DS, Pantazopoulos I. සහ Gurgulyanis KI හදිසි අවස්ථා දෙපාර්තමේන්තු වල COVID-19 පිළිබඳ බුද්ධිමත් රෝග විනිශ්චය: ප්‍රායෝගිකව අන්තයේ සිට අවසානය දක්වා ඒකාබද්ධ කිරීම. විශේෂඥ Reverend Respire. ඖෂධය. 3, 263-272 (2022).
Mitchell, SL & St George, K. COVID19 ID දැන් EUA විශ්ලේෂණය ඇගයීම. Mitchell, SL & St George, K. COVID19 ID දැන් EUA විශ්ලේෂණය ඇගයීම.Mitchell, SL සහ St. George, K. COVID19 ID NOW EUA තක්සේරුව ඇගයීම.Mitchell SL සහ St. George K. COVID19 ID NOW EUA තක්සේරුව ඇගයීම. J. සායනික. වයිරසය. 128, 104429. https://doi.org/10.1016/j.jcv.2020.104429 (2020).
WHO. සැක සහිත මානව රෝග 2019 (COVID-19) කොරොන වයිරස් රෝගය රසායනාගාර හඳුනා ගැනීම. https://www.who.int/publications/i/item/10665-331501 (ප්‍රවේශය 15 අගෝස්තු 2020) (WHO, 2020).
උඩුගම, බී සහ අල්. COVID-19 රෝග විනිශ්චය: රෝග සහ පරීක්ෂණ මෙවලම්. ACS නැනෝ 14(4), 3822–3835 (2020).
Syed S. et al. නැගෙනහිර, මධ්‍යම සහ දකුණු අප්‍රිකාවේ ව්‍යාධි විද්‍යා ologists යින්ගේ විද්‍යාලය පිහිටුවීම - මැද පෙරදිග සහ දකුණු අප්‍රිකාවේ ව්‍යාධි විද්‍යාව පිළිබඳ කලාපීය පාසල. අප්රිකාව. J. රසායනාගාරය ඖෂධය. 9(1), 1-8 (2020).
ඉතියෝපියානු මහජන සෞඛ්‍ය ආයතනය, ෆෙඩරල් සෞඛ්‍ය අමාත්‍යාංශය. COVID-19 රසායනාගාර රෝග විනිශ්චය සඳහා අන්තර්කාලීන ජාතික උපාය මාර්ගය සහ මාර්ගෝපදේශය. https://ephi.gov.et/images/novel_coronavirus/EPHI_PHEOC_COVID-19_Laboratory_Diagnosis_Eng.pdf (ප්‍රවේශය 12 අගෝස්තු 2020) (EPHI, 2020).
Woloshin, S., Patel, N. & Kesselheim, AS SARS-CoV-2 ආසාදන අභියෝග සහ ඇඟවුම් සඳහා වැරදි සෘණ පරීක්ෂණ. Woloshin, S., Patel, N. & Kesselheim, AS SARS-CoV-2 ආසාදන අභියෝග සහ ඇඟවුම් සඳහා වැරදි සෘණ පරීක්ෂණ.Voloshin S., Patel N. සහ Kesselheim AS SARS-CoV-2 ආසාදන සහ ඒවායේ ප්‍රතිවිපාක සඳහා ව්‍යාජ-සෘණ පරීක්ෂණ.Voloshin S., Patel N. සහ Kesselheim AS ප්‍රකෝප කිරීම් සහ SARS-CoV-2 ආසාදනයේ බලපෑම සඳහා ව්‍යාජ-සෘණ පරීක්ෂණ. එන්. ඉංජිනේරු J. වෛද්ය විද්යාව. 383(6), e38 (2020).
Mouliou, DS & Gourgoulianis, KI ව්‍යාජ-ධනාත්මක සහ ව්‍යාජ-සෘණ COVID-19 අවස්ථා: ශ්වසන වැළැක්වීම සහ කළමනාකරණ උපාය මාර්ග, එන්නත් කිරීම සහ වැඩිදුර ඉදිරිදර්ශන. Mouliou, DS & Gourgoulianis, KI ව්‍යාජ-ධනාත්මක සහ ව්‍යාජ-සෘණ COVID-19 අවස්ථා: ශ්වසන වැළැක්වීම සහ කළමනාකරණ උපාය මාර්ග, එන්නත් කිරීම සහ වැඩිදුර ඉදිරිදර්ශන. Mouliou, DS සහ Gourgoulianis, KI ලොපොලොජිටේල්නි සහ ලොජිනෝට්‍රිසාටෙලිනීස් ප්‍රකාශන කොවිඩ්-19: රෙස්පයිරටෝර්නියා ප්‍රොෆික්ටික් лечения, вакцинация и дальнейшие перспективы. Mouliou, DS & Gourgoulianis, KI COVID-19 හි ව්‍යාජ ධනාත්මක සහ ව්‍යාජ ඍණාත්මක අවස්ථා: ශ්වසන වැළැක්වීම සහ ප්‍රතිකාර උපාය මාර්ග, එන්නත් කිරීම සහ ඉදිරි මාර්ගය.Muliu, DS සහ Gurgulianis, KI කොවිඩ්-19 ව්‍යාජ-ධනාත්මක සහ ව්‍යාජ-සෘණ අවස්ථා: ශ්වසන වැළැක්වීම සහ ප්‍රතිකාර සඳහා උපාය මාර්ග, එන්නත් කිරීම සහ ඉදිරි මාර්ගය. විශේෂඥ Reverend Respire. ඖෂධය. 15(8), 993-1002 (2021).
Mouliou, DS, Ioannis, P. & Konstantinos, G. COVID-19 රෝග විනිශ්චය හදිසි ප්‍රතිකාර අංශයේ: ගස දැකීම නමුත් වනාන්තරය අහිමි වීම. Mouliou, DS, Ioannis, P. & Konstantinos, G. COVID-19 රෝග විනිශ්චය හදිසි ප්‍රතිකාර අංශයේ: ගස දැකීම නමුත් වනාන්තරය අහිමි වීම.Mouliou, DS, Ioannis, P. සහ Konstantinos, G. හදිසි අවස්ථා දෙපාර්තමේන්තුවේ COVID-19 රෝග විනිශ්චය: ගස බලන්න, වනාන්තරය නැති කරන්න.Muliou DS, Ioannis P., සහ Konstantinos G. හදිසි කාමරවල COVID-19 රෝග විනිශ්චය: ගස් සඳහා වනාන්තර ප්‍රමාණවත් නොවේ. පෙනී සිටින්න. ඖෂධය. ජේ. https://doi.org/10.1136/emermed-2021-212219 (2022).
Degli-Angeli, E. et al. ඇබට් රියල් ටයිම් SARS-CoV-2 විශ්ලේෂණයේ විශ්ලේෂණාත්මක සහ සායනික කාර්ය සාධනය වලංගු කිරීම සහ වලංගු කිරීම. J. සායනික. වයිරසය. 129, 104474. https://doi.org/10.1016/j.jcv.2020.104474 (2020).
Mollaei, HR, Afshar, AA, Kalantar-Neyestanaki, D., Fazlalipour, M. & Aflatoonian, B. සාම්ප්‍රදායික RT-PCR මගින් වෛරස් ආසාදනය හඳුනා ගැනීම සඳහා COVID-19 හි විවිධ ජෙනෝම ප්‍රදේශවලින් ප්‍රාථමික කට්ටල පහක් සංසන්දනය කරන්න. Mollaei, HR, Afshar, AA, Kalantar-Neyestanaki, D., Fazlalipour, M. & Aflatoonian, B. සාම්ප්‍රදායික RT-PCR මගින් වෛරස් ආසාදනය හඳුනා ගැනීම සඳහා COVID-19 හි විවිධ ජෙනෝම කලාපවලින් ප්‍රාථමික කට්ටල පහක් සංසන්දනය කිරීම.Mollaei, HR, Afshar, AA, Kalantar-Neyestanaki, D., Fazlalipour, M. සහ Aflatunyan, B. සාම්ප්‍රදායික RT-PCR මගින් වෛරස් ආසාදන හඳුනා ගැනීම සඳහා COVID-19 ජෙනෝමයේ විවිධ ප්‍රදේශවලින් ප්‍රයිමර් කට්ටල පහක් සංසන්දනය කිරීම. Mollaei, HR, Afshar, AA, Kalantar-Neyestanaki, D., Fazlalipour, M. & Aflatoonian, B. 比较来自COVID-19不同基因组区域的五个引物组，用于通过常规RT-PCR 检测病毒感染。 Mollaei, HR, Afshar, AA, Kalantar-Neyestanaki, D., Fazlalipour, M. & Aflatoonian, B. සම්ප්‍රදායික RT-PCR මගින් වෛරස් ආසාදන හඳුනා ගැනීම සඳහා COVID-19 හි විවිධ ප්‍රවේණි කලාප 5 සංසන්දනය කිරීම.Mollaei HR, Afshar AA, Kalantar-Neyestanaki D, Fazlalipour M. සහ Aflatunyan B. සාම්ප්‍රදායික RT-PCR මගින් වෛරස් ආසාදන හඳුනා ගැනීම සඳහා COVID-19 ජෙනෝමයේ විවිධ ප්‍රදේශවලින් ප්‍රයිමර් කට්ටල පහක් සංසන්දනය කිරීම.ඉරානය. J. ක්ෂුද්ර ජීව විද්යාව. 12(3), 185 (2020).
Goertzer, I. et al. SARS-CoV-2 ජාන අනුපිළිවෙල හඳුනාගැනීම සඳහා ජාතික බාහිර තත්ත්ව ඇගයීම් වැඩසටහනේ මූලික ප්‍රතිඵල. J. සායනික. වයිරසය. 129, 104537. https://doi.org/10.1016/j.jcv.2020.104537 (2020).
වැන්ග්, එම්. සහ අල්. දරුණු උග්‍ර ශ්වසන සින්ඩ්‍රෝමය කොරෝනා වයිරස් සඳහා RT-PCR කට්ටල පහක කාර්යක්ෂමතාව පිළිබඳ විශ්ලේෂණාත්මක ඇගයීම 2. J. සායනික. රසායනාගාරය. ගුදය. 35(1), e23643 (2021).
වැන්ග් බී සහ අල්. තත්‍ය කාලීන පොලිමරේස් දාම ප්‍රතික්‍රියාව (PCR) මත පදනම්ව චීනයේ වාණිජමය වශයෙන් ලබා ගත හැකි SARS-CoV-2 RNA හඳුනාගැනීමේ කට්ටල හතක් ඇගයීම. සායනික. රසායනික. රසායනාගාරය. ඖෂධය. 58(9), e149–e153 (2020).
van Casteren, PB et al. වාණිජ RT-PCR COVID-19 රෝග විනිශ්චය කට්ටල හතක් සංසන්දනය කිරීම. J. සායනික. වයිරසය. 128, 104412 (2020).
ලු, යූ, සහ අල්. SARS-CoV-2 න්‍යෂ්ටික අම්ල හඳුනාගැනීම සඳහා PCR කට්ටල දෙකක රෝග විනිශ්චය කාර්ය සාධනය සංසන්දනය කිරීම. J. සායනික. රසායනාගාරය. ගුදය. 34(10), e23554 (2020).
Lefart, PR, ආදිය. SARS-CoV-2 න්‍යෂ්ටික අම්ල වර්ධක පරීක්ෂණ (NAAT) වේදිකා හතරක සංසන්දනාත්මක අධ්‍යයනයකින් පෙන්නුම් කළේ රෝගියා සහ නියැදි වර්ගය අනුව ID NOW කාර්ය සාධනය සැලකිය යුතු ලෙස පිරිහී ඇති බවයි. රෝග විනිශ්චය. ක්ෂුද්ර ජීව විද්යාව. ආසාදනය කරන්න. තැටිය. 99(1), 115200 (2021).
ඇබට් අණුව. ඇබට් තත්‍ය කාලීන SARS-CoV-2 විශ්ලේෂණ පැකේජ ඇතුළු කිරීම. https://www.molecular.abbott/us/en/products/infectious-disease/RealTime-SARS-CoV-2-Assay. 1-12. (2020 අගෝස්තු 10 වන විට) (2020).
ක්ලීන්, එස්. සහ අල්. RT-qPCR සහ RT-LAMP මගින් වේගවත් මහා පරිමාණ හඳුනාගැනීම සඳහා චුම්බක පබළු භාවිතයෙන් SARS-CoV-2 RNA හුදකලා කිරීම. වෛරස් 12(8), 863 (2020).